产品货号:
M20030
中文名称:
T7核酸内切酶I
英文名称:
T7 Endonuclease I
产品规格:
250U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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T7 Endonuclease I识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。该酶切割错配碱基5’端的第一、第二、或第三个磷酸二酯键。
1单位指在50μL反应体系,37℃条件下,1h将90%以上的1μg超螺旋十字型结构pUC(AT)*转化成线性DNA结构所需的酶量。
组分 | 规格 |
T7 Endonuclease I(10U/μL) | 25μL |
5×T7EI Reaction Buffer | 1mL |
Control primer (10μM) | 20μL |
Control template C (30ng/μL) | 10μL |
Control template D (30ng/μL) | 10μL |
保存:-20℃,有效期1年。
- 用T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度
超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃,会导致酶活性降低。 - 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 分别以突变体DNA和野生型DNA为模板,PCR扩增含突变位点的片段,片段长度约500bp,突变位点避免位于片段中间,便于区分切割后条带;
- 变性退火PCR产物:
成分 用量 5×T7EI Reaction Buffer 2μL PCR product 0.3μg RNase-Free Water 至9μL - 酶切反应:上步反应液中加入0.5μL T7 E1酶,37℃保温15~30min,立即加入DNA loading buffer终止反应,混匀后65℃保温10min,琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。
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